初級(jí)藥士/藥師考試輔導(dǎo)：檢測(cè)細(xì)菌遺傳物質(zhì)

　　通過檢測(cè)病原體遺傳物質(zhì)來確認(rèn)病原體也許是檢查病原體為直接的方法了。目前比較成熟的技術(shù)包括基因探針技術(shù)和PCR技術(shù)。

　　(一)基因探針技術(shù)

　　用標(biāo)記物標(biāo)記細(xì)菌染色體或質(zhì)粒DNA上的特異性片段制備成細(xì)菌探針，待檢標(biāo)本經(jīng)過短時(shí)間培養(yǎng)后，經(jīng)過點(diǎn)膜、裂解變性、預(yù)雜交和雜交后，利用探針上標(biāo)記物發(fā)出的信號(hào)可以知道雜交結(jié)果并判斷病原體的性質(zhì)�；�因探針技術(shù)操作比較復(fù)雜，加之同位素污染等問題，目前尚不能普及應(yīng)用。近年來發(fā)展起來的地高辛標(biāo)記的非同位素探針，從探針標(biāo)記到雜交都很方便，只是價(jià)格昂貴，仍限于科研應(yīng)用，尚不能普及。

　　(二)PCR技術(shù)

　　這是八十年代末發(fā)展起來的一項(xiàng)極有應(yīng)用價(jià)值的技術(shù)，設(shè)計(jì)病原體基因的特異引物，細(xì)菌標(biāo)本(不經(jīng)培養(yǎng))經(jīng)過簡(jiǎn)單裂解、變性后，就可在PCR儀上進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)，經(jīng)過25～30個(gè)循環(huán)，通過瓊脂糖電泳即可觀察擴(kuò)增結(jié)果，檢出病原體。這種技術(shù)的特點(diǎn)是簡(jiǎn)便、快速。它尤其適于那些培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)的病原菌的檢查，如結(jié)核桿菌、支原體等。PCR高度的敏感性使該技術(shù)在病原體診斷過程中極易出現(xiàn)假陽性，避免污染是提高PCR診斷準(zhǔn)確性的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

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