1.免疫熒光技術(shù)

　　免疫熒光技術(shù)是利用熒光素標記的抗體(或抗原)檢測組織、細胞或血清中的相應抗原(或抗體)的方法。由于熒光抗體具有安全、靈敏的特點，因此已廣泛應用在免疫熒光檢測和流式細胞計數(shù)領域。根據(jù)熒光素標記的方式不同，可分為直標熒光抗體和間標熒光抗體。間標熒光抗體中一抗并不直接連接熒光素，而是先將一抗結(jié)合到蛋白，然后帶有熒光素的二抗再結(jié)合至一抗。通過二抗的結(jié)合，能將信號進行放大，因此能在一定程度上提高檢測的靈敏度，但是隨之帶來的高背景也降低了檢測的特異性。近年來，隨著熒光素和熒光檢測技術(shù)的不斷進步，熒光檢測的靈敏度已經(jīng)接近同位素檢測的水平，直接標記的熒光抗體逐漸取代間接標記抗體。這些標記了熒光素的抗體直接結(jié)合至抗原，大大提高了檢測的特異性，使檢測的結(jié)果更加準確可靠。熒光檢測技術(shù)的發(fā)展，使得免疫熒光技術(shù)在傳染病診斷上有廣泛的用途，如在細菌、病毒、螺旋體感染的疾病，檢查IgM抗體，做為近期接觸抗原的標志。利用單克隆熒光直接標記抗體鑒定淋巴細胞的亞類。通過流式細胞儀，針對細胞表面不同抗原，可以同時使用多種不同的熒光抗體，對同一細胞進行多標記染色。

　　2.放射免疫檢測

　　放射免疫檢測技術(shù)是目前靈敏度最高的檢測技術(shù)，利用放射性同素標記抗原(或抗體)，與相應抗體(或抗原)結(jié)合后，通過測定抗原抗體結(jié)合物的放射性檢測結(jié)果。放射性同位素具有pg 級的靈敏度，且利用反復曝光的方法可對痕量物質(zhì)進行定量檢測。但放射性同位素對人體的損傷也限制了該方法的使用。

　　3.酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)

　　酶聯(lián)免疫檢測是目前應用最廣泛的免疫檢測方法。該方法是將二抗標記上酶，抗原抗體反應的特異性與酶催化底物的作用結(jié)合起來，根據(jù)酶作用底物后的顯色顏色變化來判斷試驗結(jié)果，其敏感度可達ng 水平。常見用于標記的酶有辣根過氧化物酶(HRP)、堿性磷酸酶(AP)等。由于酶聯(lián)免疫法無需特殊的儀器，檢測簡單，因此被廣泛應用于疾病檢測。常用的方法有間接法、夾心法以及BAS-ELISA。間接法是先將待測的蛋白抱被在孔板內(nèi)，然后依次加入一抗、標記了酶的二抗和底物顯色，通過儀器(例如酶標儀)定量檢測抗原。這種方法操作簡單但由于高背景而特異性較差。目前已逐漸被夾心法取代。夾心法利用二種一抗對目標抗原進行捕獲和固定，在確保靈敏度的同時大大提高了反應的特異性。近年來，抗原的定量檢測技術(shù)也不斷推陳出新。近年來，在夾心法ELISA 的基礎上，開發(fā)了多抗原檢測試劑盒，能同時檢測微量液相樣本中多個抗原含量。這項技術(shù)的應用大大縮短了診斷的時間，提高診斷的可靠性和及時性。

　　4.免疫金膠體技術(shù)

　　膠體金技術(shù)經(jīng)過30 多年的發(fā)展到現(xiàn)在已日趨成熟，該方法是將二抗標記上膠體金顆粒，利用抗原抗體間的特異性反應，最終將膠體金標記的二抗吸附于滲濾膜上，此方法簡單，快速，廣泛應用于臨床篩查。

　　例題：

　　1、首次用于人工被動免疫的制劑是

　　A、破傷風抗毒素 B、破傷風類毒素 C、肉毒類毒素 D、白喉類毒素 E、白喉抗毒素

　　2、機體免疫防御功能過高可導致

　　A、嚴重感染 B、免疫缺陷 C、超敏反應 D、自身免疫病 E、腫瘤

　　3、T細胞主要位于淋巴結(jié)的

　　A、深皮質(zhì)區(qū) B、淋巴結(jié) C、淺皮質(zhì)區(qū) D、髓竇

　　4、B細胞抗原識別受體是

　　A、TCR B、CR2 C、CD3 D、FCR E、mIg

　　5、與外毒素有相同免疫原性的物質(zhì)是

　　A、抗毒素 B、 細菌素 C、類毒素 D、 抗生素 E、干擾素

　　參考答案

　　1-5 ECAEC

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