絮狀沉淀試驗

　　絮狀沉淀試驗為歷史較久，又較有用的方法。該法要點是：將抗原與抗體溶液混合在一起，在電解質(zhì)存在下，抗原與抗體結(jié)合，形成絮狀沉淀物。這種沉淀試驗受到抗原和抗體比例的直接影響，因而產(chǎn)生了兩種最適比例的基本測定方法。

　　(一)抗原稀釋法

　　抗原稀釋法(Dean-Webb法)是將可溶性抗原作一系列稀釋，與恒定濃度的抗血清等量混合，置室溫或37℃反應(yīng)后，產(chǎn)生的沉淀物隨抗原的變化而不同。表12-1系以牛血清白蛋白為例的實驗結(jié)果。

　　表12-1Dean-Webb定量沉淀試驗

　　單位：mmol/L

　　從表12-1可以看出，1～5管為抗體過剩管，7～10管為抗原過剩管，唯第6管沉淀物最多，兩者之比為16:1，即最適比。

　　(二)抗體稀釋法(Ramon)法

　　本法采用恒定的抗原量與不同程度稀釋的抗體反應(yīng)，計算結(jié)果同上法，得出的是抗體結(jié)合價和最適比。

　　現(xiàn)今，為了取得抗原與抗體的最佳比例，已將以上兩法相結(jié)合，即抗原和抗體同時稀釋，稱為棋盤格法(亦稱方陣法)，找出最佳配比。舉例見表12-2。

　　表12-2方陣最適比測定

　　“+”為沉淀物量：為最適比

　　從表12-2可以看出，方陣法可較正確地找出抗原與抗體的最適比。如抗體用1:40。抗原則按1:320稀釋;如抗原是1:160，抗本則用1:20最為恰當。二、環(huán)狀沉淀試驗

　　環(huán)狀沉淀試驗是Ascoli于1902年建立的，其方法是：先將抗血清加入內(nèi)徑1.5～2mm小玻管中，約裝1/3高度，再用細長滴管沿管壁疊加抗原溶液。因抗血清蛋白濃度高，比重較抗原大，所以兩液交界處可形成清晰的界面。此處抗原抗體反應(yīng)生成的沉淀在一定時間內(nèi)不下沉。一般在室溫放置10min至數(shù)小時，在兩液交界處呈現(xiàn)白色環(huán)狀沉淀則為陽性反應(yīng)。本技術(shù)的敏感度為3～20μg/ml抗原量。環(huán)狀試驗中抗原、抗體溶液須澄清。該試驗主要用于鑒定微量抗原，如法醫(yī)學(xué)中鑒定血跡，流行病學(xué)用于檢查媒介昆蟲體內(nèi)的微量抗原等，亦可用于鑒定細菌多糖抗原。因該技術(shù)敏感度低，且不能作兩種以上抗原的分析鑒別，現(xiàn)已少用。